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Protein Research Kit (CFS-PRK-16)

廠家:天根生化科技(北京)有限公司
  目錄號 規 格 價 格
CFS-PRK-G16 226 μl×16 rxn 14000元
CFS-PRK-H16 226 μl×16 rxn 14000元
CFS-PRK-S16 226 μl×16 rxn 13000元
活動時間:11月11日--11月20日

目錄價滿額贈禮
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產品簡介:

本系列試劑盒能夠通過線性模板或質粒模板實現蛋白的中量表達。本系列試劑盒采用轉錄和翻譯非偶聯的方法,試劑盒中提供包含體外轉錄所需的酶、NTP和離子環境的Transcription PreMix LM,加入模板后先完成DNA的轉錄,再配合麥胚無細胞蛋白表達系統預混mix完成mRNA的翻譯,該mix中包含蛋白翻譯的所有必需酶類、各種tRNA和離子,從而獲取目的蛋白。本系列試劑盒利用雙層液相反應法(Bilayer)表達目的蛋白,每個反應蛋白表達量為30 μg左右,適合western blotCBB染色等蛋白檢測實驗和蛋白結構解析以及免疫共沉淀等常見蛋白質功能解析。此外,本系列中的H24G24試劑盒專門為表達His標簽蛋白和GST標簽蛋白做特殊優化,使得純化后的蛋白純度更高。


產品特點:

選擇方便:可用質粒模板,也可直接使用PCR片段進行蛋白表達

操作簡單:采用Bilayer 反應方法,不需要特殊儀器,只需加入模板即可進行反應

表達高效:一天內完成蛋白表達,蛋白表達量可達30 μg

適用面廣:特別針對His標簽蛋白或GST標簽蛋白的表達進行特殊優化,提高純度


保存條件

低于-70保存,避免長期存放于干冰環境,反復凍融不超過2次。


實驗例


使用質粒作為表達模板時,可以使用pEU系列質粒作為表達載體,將帶有起始密碼子和終止密碼子的cDNA克隆至載體上,提取質粒后直接用于蛋白表達。亦可使用其他帶有SP6啟動子的表達載體進行蛋白表達,不要使用T7啟動子。



使用PCR片段做表達模板時,應使用兩步PCR反應,將核糖體結合位點和轉錄啟動子作為上游引物的5’端,經PCR反應結合到片段上。片段純化后可用于蛋白表達。



蛋白翻譯采用雙層液相反應法(Bilayer Reaction Method),通過反應液和麥胚裂解物造成的密度差,相互滲透,在液面相交處發生反應。隨著時間的推進,溶液逐漸由兩相變為單一的混合物而終止。



使用Protein Research Kit表達GFP蛋白,分別用熒光檢測(折線圖)和考馬斯亮藍(CBB)染色檢測(PAGE圖)蛋白表達量。轉錄時間為371小時,翻譯溫度為15,通過翻譯時間梯度展示蛋白表達量。結果顯示,翻譯4小時即可觀測到蛋白表達,20小時可達到最大蛋白表達量。

地址:北京市海淀區西小口路66號東升科技園(北領地)C7-3 電話:800-990-6057
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